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Solução de problemas de ensaios de imunofluorescência |
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Problema: O controle negativo é positivo.
Causas possíveis: |
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| 1. | Quando espécimes de soro são lavados inicialmente das cavidades do substrato, o leve fluxo de PBS deve ser concentrado para atingir o meio da lâmina (a máscara) para remover o soro das linhas superior e inferior diretamente em uma lixeira ou pia. O soro diluído lavado ao longo de uma cavidade vizinha pode influenciar a reação nessa cavidade. Isto acontece especialmente com soro titulado alto rodeado por cavidades contendo soro negativo. |
| 2. | Outra causa possível é similar em natureza, um movimento repentino inadvertido da lâmina ou câmara de incubação mistura as amostras de uma cavidade a outra. Uma inspeção cuidadosa das lâminas após a incubação pode observar diferentes volumes de cavidades ou líquido na máscara da lâmina entre cavidades. |
Perguntas/problemas
- O controle positivo está negativo ou muito fraco.
- Células de antígeno ou substrato manchadas ou ausentes de cavidades antes do teste.
- Células de antígeno ou substrato lavadas durante o procedimento.
- O controle negativo é positivo.
- As reações são mais fortes nas bordas da cavidade do que na parte central da mesma.
